潤膚膏霜霉菌總數檢驗主要基于霉菌在特定培養基上的生長特性。霉菌在適宜的營養、溫度、濕度等條件下，能夠在培養基中攝取養分并不斷繁殖，形成肉眼可見的菌落。通過將潤膚膏霜樣品進行稀釋處理，使其中的霉菌均勻分散，再將稀釋液接種到適合霉菌生長的培養基上，經過一定時間的培養，培養基上生長出的霉菌菌落數量，就能夠反映出原潤膚膏霜樣品中的霉菌含量情況。

　　潤膚膏霜霉菌總數檢驗方法

　　（1）樣品稀釋

　　稱取25g潤膚膏霜樣品，放入裝有225mL無菌生理鹽水并帶有玻璃珠的三角瓶中。玻璃珠的作用是在振蕩時，幫助將樣品充分分散，使霉菌均勻分布在生理鹽水中。使用電動振蕩器或手搖振蕩，振蕩時間不少于20分鐘，確保樣品與生理鹽水充分混合，得到1:10的樣品勻液。

　　用1mL無菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入裝有9mL無菌生理鹽水的試管中，吹吸3次，使充分混勻，此為1:100的稀釋液。換用一支1mL無菌吸管，從此試管中吸取1mL稀釋液，注入另一裝有9mL無菌生理鹽水的試管中，再次混勻，制成1:1000的稀釋液。依此類推，根據樣品中霉菌污染程度的預估，可繼續進行適當倍數的稀釋，如1:10000等。

　　（2）接種培養

　　根據對樣品霉菌污染程度的初步判斷，選擇2-3個適宜稀釋度的稀釋液。例如，若懷疑樣品霉菌污染程度較高，可選擇1:100、1:1000、1:10000三個稀釋度。用無菌吸管分別吸取0.1mL不同稀釋度的稀釋液，注入無菌培養皿中，每個稀釋度重復2-3個培養皿。

　　將冷卻至（46±1）℃的孟加拉紅培養基傾注到含有稀釋液的培養皿中，每皿約15-20mL，迅速輕輕搖勻，使稀釋液與培養基充分混合。待培養基凝固后，將培養皿倒置放入（28±1）℃的恒溫培養箱中培養5-7天。倒置培養皿是為了防止培養過程中產生的冷凝水落到培養基表面，影響霉菌菌落的生長和計數，同時也可減少外界微生物對培養基的污染。

　　（3）菌落計數

　　培養結束后，從恒溫培養箱中取出培養皿，在明亮處進行霉菌菌落計數。選擇菌落數在10-150CFU之間的培養皿進行計數。若所有稀釋度的培養皿中菌落數均大于150CFU，則選擇菌落數最多的稀釋度，計數該稀釋度下培養皿中的全部菌落數；若所有稀釋度的培養皿中菌落數均小于10CFU，則選擇菌落數最少的稀釋度進行計數。

　　計數時，注意區分霉菌菌落與其他雜質或細菌菌落。霉菌菌落一般較大，形態多樣，如絨毛狀、絮狀、蜘蛛網狀等，顏色豐富，有黑色、綠色、黃色、白色等；而細菌菌落相對較小、光滑濕潤。對于難以區分的菌落，可借助顯微鏡進一步觀察其形態特征，以準確判斷是否為霉菌菌落。

　　計算霉菌總數時，先計算同一稀釋度下兩個或多個培養皿中霉菌菌落數的平均值，再乘以相應的稀釋倍數，即為每克潤膚膏霜樣品中的霉菌總數（CFU/g）。例如，1:1000稀釋度的三個培養皿中霉菌菌落數分別為35、40、45CFU，其平均值為（35+40+45）÷3=40CFU，則樣品中的霉菌總數為40×1000=40000CFU/g。